導(dǎo)讀三鹿“三聚氰胺”毒奶粉事件已經(jīng)過去多年，當(dāng)年的給我國乳業(yè)帶來的空前沉重的打擊，催生了奶粉檢測技術(shù)的革新。但蛋白質(zhì)各具特異性不同蛋白質(zhì)中氨基酸組分不同，如何準(zhǔn)....

三鹿“三聚氰胺”毒奶粉事件已經(jīng)過去多年，當(dāng)年的給我國乳業(yè)帶來的空前沉重的打擊，催生了奶粉檢測技術(shù)的革新。但蛋白質(zhì)各具特異性不同蛋白質(zhì)中氨基酸組分不同，如何準(zhǔn)確測定含奶粉中的硫氨基酸，微源檢測實(shí)驗(yàn)室查閱文獻(xiàn)資料，實(shí)驗(yàn)了一種使用二硫蘇糖醇做作為還原劑后進(jìn)反相高效液相色譜的檢測方式。

二硫蘇糖醇（DTT）外觀白色固體，化學(xué)式為C4H10O2S2。是種小分子有機(jī)還原劑，還原性較強(qiáng)，主要應(yīng)用于生物技術(shù)領(lǐng)域。

樣品前處理；準(zhǔn)確稱量樣品，加人3.0mL6mol／L鹽酸溶液，低溫冷凍后氮?dú)獯蹈桑獨(dú)鉅顟B(tài)下封口，120℃水解24小時(shí)。水解結(jié)束后取出，冷卻至室溫開封后用pH=9.0硼砂-硼酸緩沖液定容10mL，搖晃均勻后靜置離心操作，取上清2.0mL加入適量二硫蘇糖醇（DTT）等待反應(yīng)結(jié)束，40℃氮?dú)獯蹈桑胮H=9.0硼砂-硼酸緩沖液溶解，搖晃均勻。

吸取上述1.0mL樣品溶液于具塞試管中衍生操作，振蕩后并加入5.0mLpH=9.0硼砂-硼酸緩沖液及2.0mL氯-3，5-二硝基三氟甲苯(CNBF）溶液，封口65℃水浴0.5小時(shí)。衍生結(jié)束后取出置于室溫，振蕩后加入15mLpH=7.0磷酸緩沖液，振蕩30s，靜置10min后取少量液體過0.22um微孔濾膜。

色譜柱	C18MGII(5μm，4.6mmi.d×250mm)；
流動(dòng)相	A：乙腈；B：pH5乙酸-乙酸鈉緩沖液
檢測波長	240nm
流速	0.32mL／min
進(jìn)樣量	20μL

精確稱取奶粉樣品0.05g5份，分別加入40mmol／L蛋氨酸、胱氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液25μL、50μL、75μL，三次平行，操作同上。

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)基線平穩(wěn)無雜峰含硫氨基酸峰高明顯增大，操作簡單，耗時(shí)少，適用于奶粉中含硫氨基酸的定量檢測。隨著檢測技術(shù)的不斷發(fā)展，高效液相色譜法可以作為檢測乳品蛋白質(zhì)摻假的標(biāo)準(zhǔn)流程方法。