導讀3月2日國家藥品監督管理局組織起草了《化妝品中防腐劑檢驗方法》《化妝品中硼酸和硼酸鹽檢驗方法》《化妝品中對苯二胺等32種組分檢驗方法》《化妝品中維甲酸等8種....

3月2日國家藥品監督管理局組織起草了《化妝品中防腐劑檢驗方法》《化妝品中硼酸和硼酸鹽檢驗方法》《化妝品中對苯二胺等32種組分檢驗方法》《化妝品中維甲酸等8種組分檢驗方法》《體外哺乳動物細胞微核試驗》《化妝品祛斑美白功效測試方法》《化妝品防脫發功效測試方法》7項檢驗方法，經化妝品標準專家委員會全體會議審議通過，并發布，作為《化妝品安全技術規范（2015年版）》（以下簡稱《規范》）修訂或新增的檢驗方法，納入《規范》相應章節。

針對化妝品安全問題，我國相繼出臺了多項監管政策。上述7項檢驗方法中，前4項為《規范》修訂的檢驗方法，自2021年5月1日起施行，原有檢驗方法同時廢止；后3項檢驗方法為《規范》新增的檢驗方法，通告發布之日起施行。

今天，妝溯將跟大家大家一同分享《規范》中最新修訂的《化妝品中硼酸和硼酸鹽檢測方法》。

硼在化妝品中以硼酸、硼酸鹽和四硼酸鹽的形式存在，具有一定的抗菌防腐作用。但是如果不慎吸入或被創口吸收，可引起急性中毒，出現惡心、腹瀉等癥狀，嚴重的還可出現昏厥、腎衰竭甚至死亡。所以，化妝品中硼酸和硼酸鹽的含量成分需要進行嚴格的管控。

以下是中國和歐盟關于化妝品中硼酸的監管限量要求：

表 1 中國和歐盟關于化妝品中的硼酸監管要求

最新修訂的《化妝品中硼酸和硼酸鹽檢測方法》其最大亮點則是將操作繁瑣、分析誤差大的甲亞胺-H分光光度測定方法改為靈敏度高、抗干擾強的離子色譜法，同時增加了離子色譜-電感耦合等離子體質譜法進行結果確認。

01標準中使用的離子色譜條件

色譜柱：IonPac ICE Borate （9 mm ×250 mm）離子排斥分析柱，或等效色譜柱；

抑制器：排斥型陰離子微膜抑制器（ACRS-ICE 500 9 mm），或等效抑制器；

淋洗液：3 mmol/L甲烷磺酸 60 mmol/L甘露醇；

化學抑制再生液：25 mmol/L四甲基氫氧化銨 15 mmol/L甘露醇；

淋洗液流速：1.0 mL/min；

再生液流速：1.0 mL/min；

柱溫：30 ℃；

進樣量：25 μL；

檢測器：化學抑制型電導檢測器。

條件中所用的是甲磺酸的酸性淋洗條件，在酸性條件下（～pH2.6），硼酸鹽會以硼酸(H3BO3)的形式存在，這就是為什么中國和歐盟規范中都提到最大允許濃度要用硼酸計。舉例來說，四硼酸鈉(Na2B4O7)就能立即與強酸甲磺酸(CH3SO3H)反應生成硼酸。另外，在酸性條件下，硼酸與甘露醇(C6O6H14)可形成穩定的負離子絡合物，使其易于被電導檢測。

因此，方法中選擇甲磺酸作為淋洗劑進行硼酸分離，同時加入甘露醇的淋洗劑可進一步提高待測物在離子排斥條件下的檢測靈敏度。

圖 1 四硼酸鹽、硼酸和甘露醇在酸性條件下的反應（～pH2.6，3mM MSA）

02獨特分離選擇性

排斥型離子色譜法中的強酸性離子化合物由于受到 Donnan排斥，無法保留在色譜柱上，因此基本上是在死體積洗脫。

弱酸性離子化合物由于質子化作用，可以穿過Donnan膜進入固定相，解離度越低的物質越容易進入固定相，其保留值也就越大。

所以，離子排斥色譜是解決弱酸性硼酸與強酸性離子分離問題的有效途徑。但化妝品成分復雜，常加入蘋果酸、檸檬酸、丙三醇調節基質的PH值，并賦予產品保濕功能，在普通排斥色譜柱中干擾硼酸的測定。

《規范》中使用了對硼酸具有獨特選擇性的排斥色譜柱——IonPac ICE borate。選擇色譜條件可有效消除檸檬酸、丙三醇等物質的干擾。

圖 2 某樣品及加標樣品中硼酸的分離檢測譜圖

化妝基質結構復雜，前處理工藝必不可少。對硼酸及可溶性硼酸鹽，《規范》中采用水或甲醇-水的提取方法，經RP柱凈化后進行測定。對硼酸和硼酸鹽總量的測定，處理方法是將碳酸鈉溶液加入稱量好的試樣中，轉移到高溫爐中，用完全灰化后的鹽酸溶液溶解灰分，用水稀釋定容后，經Ag柱、H柱處理。