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發(fā)布時(shí)間:2025-10-27閱讀(0)
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trizol法提取rna原理:在勻質(zhì)化或溶解樣品中,Trizol試劑可保持RNA的完整性,同時(shí)能破壞細(xì)胞及溶解細(xì)胞成分,加入氯仿離心后,裂解液分層成水相和有機(jī)相,RNA存在于水相中,水相轉(zhuǎn)移后,RNA通過(guò)異丙醇沉淀回收,移去水相后,用乙醇可從中間相沉淀得到DNA,加入異丙醇沉淀可從有機(jī)相得到蛋白質(zhì)。
Trizol是一種總RNA抽提試劑,內(nèi)含異硫氰酸胍等物質(zhì),能迅速裂解細(xì)胞,抑制細(xì)胞釋放出的核酸酶活性,目前常用Trizol法進(jìn)行提取組織或細(xì)胞中的RNA,RNA的堿基配對(duì)規(guī)則基本和DNA相同,不過(guò)除了A-U、G-C配對(duì)外,G-U也可以配對(duì)。 在細(xì)胞中,根據(jù)結(jié)構(gòu)功能的不同,RNA主要分三類(lèi),即tRNA(轉(zhuǎn)運(yùn)RNA),rRNA(核糖體RNA),mRNA(信使RNA),mRNA是合成蛋白質(zhì)的模板,內(nèi)容按照細(xì)胞核中的DNA所轉(zhuǎn)錄;tRNA是mRNA上堿基序列(即遺傳密碼子)的識(shí)別者和氨基酸的轉(zhuǎn)運(yùn)者;rRNA是組成核糖體的組分,是蛋白質(zhì)合成的工作場(chǎng)所。
trizol法提取rna法優(yōu)點(diǎn):提取成本低,適用物種廣泛,操作者可根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)材料的特點(diǎn)靈活調(diào)整實(shí)驗(yàn)步驟達(dá)到最優(yōu)的提取效果,適用于經(jīng)驗(yàn)豐富的科研老司機(jī);缺點(diǎn):操作步驟繁瑣、耗時(shí)長(zhǎng)。 |
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